由于朊病毒的特殊性,周文做實(shí)驗(yàn)時(shí)格外小心。
生物口罩、生物手套、生化防護(hù)服,武裝齊全。
而秦海濤他們四個(gè)人,只是幫忙打下手,沒有直接接觸裝有病毒的器皿。
檢測(cè)朊病毒,目前一共有四種方法。
1,電鏡法。
2,毛細(xì)管sds-凝膠電泳法。
3,熒光標(biāo)記肽鏈的毛細(xì)管電泳免疫測(cè)定法。
4,雙色強(qiáng)熒光目標(biāo)掃描法。
其中第二種“凝膠電泳法”是最好、最直接的檢測(cè)方法。
主要是通過(guò)理化方法--差速、超速離心,sodiumn-lauroylsarcosine(月桂酰肌氨酸)、pk處理,提純prpsc。
然后在“毛細(xì)管電泳儀”上進(jìn)行毛細(xì)管sds-凝膠電泳。
根據(jù)各組分通過(guò)檢測(cè)器時(shí),在214nm波長(zhǎng)處產(chǎn)生吸收峰的時(shí)間和峰形,鑒別出朊病毒病原因子prpsc。
這個(gè)方法標(biāo)本用量少,而且不需要免疫學(xué)試劑,判斷很直觀。
缺點(diǎn)是需要用到“超速離心機(jī)”以及“專用毛細(xì)管電泳儀”這兩樣設(shè)備。
超速離心機(jī),目前基本上都是采購(gòu)的國(guó)外品牌,售價(jià)高達(dá)50萬(wàn)rmb起。
而朊病毒專用毛細(xì)管電泳儀也非常昂貴,需要二十多萬(wàn)rmb。
價(jià)格昂貴就算了,關(guān)鍵用到的機(jī)會(huì)少啊。
一般醫(yī)院連采購(gòu)設(shè)備的錢都賺不回來(lái),也只有像江州醫(yī)院這樣有錢的三甲醫(yī)院才會(huì)采購(gòu)。
正因?yàn)槿绱?,大城市的醫(yī)療資源才稀缺。
小城市得了個(gè)怪病,你連檢測(cè)都做不了。
周文按照理化方法,一步步小心翼翼的制備試劑、提取稀釋液、放到超速離心機(jī)上分離變異朊病毒蛋白。
剛剛升級(jí)的生物免疫學(xué),讓他更加的得心應(yīng)手。
在這個(gè)過(guò)程中,周文也在教導(dǎo)秦海濤以及董文穎幾個(gè)人,告訴他們常規(guī)朊病毒理化試驗(yàn)過(guò)程中需要注意的地方。
“添加月桂酰的時(shí)候,你們一定要記住……”
這些經(jīng)驗(yàn),別說(shuō)大學(xué)教授了,就算是國(guó)內(nèi)那些朊病毒研究所的專家也講不清楚。
因?yàn)閲?guó)內(nèi)在病毒、尤其是朊病毒研究方面,基本上還處于初級(jí)階段,這些實(shí)用經(jīng)驗(yàn),只有國(guó)外那些頂尖研究所才能掌握。
比如英國(guó)肯特大學(xué)酵母朊病毒研究所。
長(zhǎng)久以來(lái),朊病毒蛋白領(lǐng)域的新發(fā)現(xiàn),幾乎都被幾個(gè)酵母領(lǐng)域的研究團(tuán)隊(duì)“壟斷”。
那些頂尖研究所,是不會(huì)輕易把技術(shù)教授給你的。
除非你能拿到他們的offer。
而秦海濤他們顯然還沒有意識(shí)到自己是有多么的幸運(yùn),只是覺得周文的講解非常的淺顯易懂,甚至連動(dòng)作要領(lǐng)都一并告訴了他們。
在周文說(shuō)的時(shí)候,秦海濤和董文穎兩個(gè)人都是聚精會(huì)神的聽著。
至于另外兩個(gè)老實(shí)驗(yàn)員,雖然表面上在聽,實(shí)際上根本沒有聽進(jìn)去。
因?yàn)樗麄冇X得,以周文的方法根本不可能提取到朊病毒,這樣的教學(xué)根本就是在紙上談兵。
周文又沒有“電眼”,他怎么可能知道這些具體的實(shí)驗(yàn)變量呢,一切不過(guò)都是他的猜測(cè)而已。
等提純好prpsc后,周文把含有朊病毒的清液注入到貝克曼p/ace5500上,進(jìn)行電泳實(shí)驗(yàn)。
“好了~”注入完畢后,周文松了口氣。
“秦海濤你留下來(lái)照看機(jī)器,其他人洗手吃飯吧?!?br/> 大家聞言,紛紛去洗手池洗手……
吃過(guò)飯后,周文哪也沒敢去,直接回了實(shí)驗(yàn)室。
常規(guī)提取法獲得的樣本太稀少了,不親自看著實(shí)在不放心……
晚上七點(diǎn)半,電泳實(shí)驗(yàn)結(jié)束。
其中一名實(shí)驗(yàn)員黃興中,拿著電泳分析單隨意的看了眼,潛意識(shí)認(rèn)為,這次的實(shí)驗(yàn)還會(huì)跟之前一樣失敗。
然而下一秒,他臉上就露出了驚訝的神色,“咦,你們快來(lái)看,好像檢測(cè)到朊病毒了……”
其余幾個(gè)人聞言,紛紛圍了過(guò)來(lái)。
“咦,還真是噯?!?br/> “老師你快來(lái)看,我們檢測(cè)到朊病毒了?!?br/> “嘶嘶……不應(yīng)該啊,這怎么可能呢,是不是搞錯(cuò)了……”
周文接過(guò)分析單仔細(xì)看了看,很快臉上露出了抑制不住的喜色。